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鸭瘟抗体ELISA检测试剂盒的实验原理和标本收集及保存
发布时间:2018-11-21   点击次数:358次
鸭瘟抗体ELISA检测试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸭α干扰素(IFN-α)水平。用纯化的鸭α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(IFN-α),再与HRP标记的α干扰素(IFN-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的α干扰素(IFN-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸭α干扰素(IFN-α)浓度。
 
鸭瘟抗体ELISA检测试剂盒标本收集及保存:
(1)血清(血浆)样本:取全血加入促凝管(抗凝管),2500转离心20分钟左右,收集上清,液氮或者-80℃冰箱保存;
(2)尿液样本:样本2500转离心20分钟左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液参照此实行;
(3)细胞样本:检测分泌性的成份时,样本2500转离心20分钟左右,液氮或者-80℃冰箱保存;检测细胞内的成份时,用PBS稀释细胞悬液,通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份,2500转离心20分钟左右,收集上清同上;
(4)组织样本:切割标本后,称取重量,用液氮或者-80℃冰箱冷冻保存备用;
(5)标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,有条件的,-70℃冻存备用,但应避免反复冻融。