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牛羊口蹄疫病毒O型抗体ELISA检测试剂盒

点击次数:24 发布时间:2019/9/12
提 供 商: 上海臻科生物科技有限公司 资料大小: PNG
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牛羊口蹄疫病毒O型抗体ELISA检测试剂盒

使用说明书

【产品名称】

通用名:牛羊口蹄疫病毒O型抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名:Test Kit for Antibodies to Bovine and sheep Foot and Mouth Disease Virus O (ELISA)

【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒

【预期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。

本试剂用于检测牛羊血清中口蹄疫病毒O型抗体,可用于口蹄疫病毒O型疫苗免疫效果评价

【原    理】

    本试剂盒系由预包被口蹄疫病毒O型抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测牛羊血清样本中口蹄疫病毒O型抗体。实验时在酶标板中加入待检样本和抗体工作液,经温育后洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,若样品中含有口蹄疫病毒O型抗体则将阻断抗体工作液与酶标板上抗原结合,从而使后续反应不出现显色;反之则出现显色;显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值, 即可知样品是否含有口蹄疫病毒O型抗体。

【试剂盒组成】

序号

名称

规格(96T×1)

规格(96T×2)

1.

酶标板

96T×1

96T×2

2.

酶标记物  (红盖)

11ml×1

11ml×2

3.

抗体工作液(紫盖)

5.5ml×1

11ml×1

4.

20X浓缩洗涤液

40ml×1

40ml×1

5。

底物液A  (白盖)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑盖)

6ml×1

11ml×1

7。

终止液  (黄盖)

6ml×1

11ml×1

8.

阳性对照  (红盖)

1.0 ml×1

1。5 ml×1

9.

阴性对照  (绿盖)

1。0 ml×1

1。5 ml×1

10.

盖板膜

1张

2张

11.

自封袋

1个

1个

12.

说明书

1份

1份

    

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

【储存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期为12个月。

包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。

【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。

【样品准备】

1.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水20倍稀释成工作洗涤液。

2。取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。

3。用工作洗涤液将待检血清样本按10倍稀释(如5μl样本加入45μl工作洗涤液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。

【检验方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2。取所需用量酶标板条,设阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl;样品孔每孔加入稀释后的样品50μl。

4。每孔加抗体工作液50μl,混匀,置37℃反应30分钟。

5.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。

6。每孔加酶标记物100μl,置37℃反应30分钟。

7.洗涤,同步骤5。

8。每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应15分钟。

9。每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照吸光值≥1.0,阳性对照吸光值≤阴性对照吸光值×50%。

【检验结果的解释】

1.PI(阻断率)=(1-样本值/阴性对照孔均值)×100%,PI≥50%为阳性;PI<50%为阴性。

2.本实验结果为阴性时表明抗体水平不足,建议补打相应疫苗。

【试验方法的局限性】

    该试验仅作为定性检测牛羊血清中口蹄疫病毒O型抗体,根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

【注意事项】

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3。酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

4。浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。

5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

6.用于检测的样品应保持新鲜。

7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

8。不同批号试剂组分不得混用。

 

 
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